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诱导表达没有目的蛋白产生是什么原因

诱导表达没有目的蛋白产生原因无非两种 一是诱导条件不适合目的蛋白的表达,可通过改变培养基,温度,诱导剂等条件重新摸索出合适的诱导条件。 二是目的蛋白的菌种有问题,可通过涂板挑选单克隆菌落重新培养,或者质粒重新转化表达菌株等方法优...

一个外源基因能不能表达,表达的产物蛋白有没有生物活性,关键不在乎基因的种类,而在于整体载体的设计——是否有适合宿主菌表达的启动子?如果你用牛的启动子在E.COLI里表达,那必然会失望;是否有合适目的蛋白折叠的环境?如果温度掌握不好,或...

内参蛋白的表达量一般比较大,而且内参蛋白的抗体通常比较好用。你要杂的目的蛋白可能表达量要远小于内参蛋白,又可能是目的蛋白的抗体不好用。因此可以考虑浓缩你的蛋白样品(增加细胞量、减少裂解液等方法)、增加目的蛋白抗体浓度、更换目的...

目的蛋白的表达跟基因本身关系密切,载体,表达条件关系也很大。空载体能表达不代表你的蛋白能在该条件下表达。

【关键词】 树突状细胞;绿色荧光蛋白;RNA;转染 Effect of dendritic cells transfected with total RNA of HepG2 cell line using GFP marker in vitro 【Abstract】 AIM: To investigate the feasibility of GFP as a marker to observe the...

SDS-PAGE条带什么都没有。是指洗脱样品部分什么都没有,还是包括流穿样品什么都没有? 如果是仅仅洗脱样品什么都没有,那么就是样品没有结合His柱的问题 如果是流穿样品和洗脱样品都没有条带,那么可能就是收集的时候出现了问题。没有收集到有蛋...

western blot能做出内参 没有目的条带就说明至少在操作上是没有问题的 同时,试剂,凝胶,膜,抗体等等都没有问题 那么最大的可能就是抗体未能识别出目的蛋白,故未能做出目的条带 也有可能是组分内的目的蛋白总量太少,未能达到检出限

无痕3个月前觉得RNA干扰(转录后基因沉默)实验难当下研究基因功能的不二之选,相对于knockout还是easy许多。从特异性序列的设计到引物合成到干扰质粒构建抑或是病毒载体介导的siRNA或miRNA的整套技术路线都已经相对比较成熟了,而且有米的话可...

方法一:westernblotandstrip通过WB检测所有发生泛素化的蛋白条带,拍照后,将膜strip。然后与特定蛋白的抗体和特定泛素化位点的抗体反应,显色拍照406通过阳性条带的对比来初步判断某一特定蛋白的特定位点发生了泛素化方法二:westernblotandim...

我估计你得摸一下最佳诱导剂浓度,最佳诱导时间和,诱导温度吧,如果你要鉴定你是浊还在进行蛋白的提取和蛋白质电泳鉴定了,如果你实验条件好的吧,你还得做一次WB(western-bloting)。加油吧,蛋白的原核表达。

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